Antibiyotiklere dirençli bakterilerin neden olduðu hastane enfeksiyonlarý önemli ekonomik ve insan saðlýðý sorunlarýna yol açmaktadýr. Bu nedenle bilim adamlarý dirençli bakterilere karþý yeni arayýþlara yönelmiþlerdir. Doðanýn sunduðu imkanlarla bu bakterilere karþý etkin bir madde bulmak amacýyla Androctonus crassicuda akrep zehirini HPLC yöntemiyle saflaþtýrarak bulunan antimikrobiyal Peptidler (AMP)’in in vitro ve sýçanlarda sepsis oluþturarak in vivo etkinliðini araþtýrmayý amaçladýk. Ayrýca saflaþtýrýlan bu peptidlerin nano partikülle kaplanarak antimikrobiyal etkinliðini güçlendimeyi düþündük. Ýn vitro çalýþmada agar kuyucuk yöntemiyle bakterilere karþý etkinlik araþtýrýldý. Etkin bulunan fraksiyonla MÝK saptandý. Ayrýca nano partikül kaplanarak karþýlaþtýrma yapýldý. Ýn vitro deneylerde AMP’nin etkili olduðu Klebsiella pneumoniae suþuyla sýçanlarda sepsis oluþturuldu. Sepsis indüksiyonunu takiben gruplar altýncý saatte tedavi amaçlý zehire maruz býrakýldý ve 24. saatte sakrifiye edildi. Sepsis bulgularýný ve denenen maddenin etkinliðini görmek amacýyla akciðer dokularý alýndý. Dokularda homojenizasyon yapýlarak ELISA ile TNF-α, IL-1β, IL-6 ve IL-10 ölçümleri yapýldý. MMP-2 ve MMP-9'lu sekonder antikor kitleri kullanýlarak hücre dýþý matriks ve fibrozis açýsýndan histopatolojik ve immünohistokimyasal incelemeler yapýldý. Elde edilen biyokimyasal, histopatolojik ve immünohistokimyasal veriler ýþýðýnda Klebsiella pneumoniae’ye karþý sepsis oluþturulan kontrol grubuna göre anlamlý farklýlýk bulunmuþtur. Ayrýca sitotoksisite belirlenmesinde HeLa hücre hattýnda dokuda geliþen lezyonlara karþý rejeneratif etkinlik gözlenmiþ, hem HeLa hücrelerinde hem de normal akciðer fibroblast hücre hattýnda yüzde yüz canlýlýk saptanmýþtýr. Bu durum histolojik olarak da sepsis grubunda akciðer doku kesitlerindeki alveolar septadaki deðiþiklikler ve inflamasyon alanlarý ile hiyalin membran yapýsýnda azalma ile gözlendi. ORCID NO: 0000-0002-8832-2121
Anahtar Kelimeler: Akrep Zehiri, Antimikrobiyal Peptit, Kitosan
|
